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大鼠HAPI,大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞系HAPI相關(guān)培養(yǎng)

發(fā)布時(shí)間:2016-10-12瀏覽:2942次

大鼠HAPI,大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞系HAPI相關(guān)培養(yǎng)

產(chǎn)品名稱(chēng):小膠質(zhì)細(xì)胞HAPI

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

組織來(lái)源:大鼠

傳代情況:P3-P5

存儲(chǔ)條件:90%FBS+10%DMSO

大鼠HAPI,大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞系HAPI相關(guān)培養(yǎng)

培養(yǎng)條件:IMDM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)12200036)80%;胎牛血清,20%

傳代方法:1:2~1:8傳代;每2~3天換液1次。

生長(zhǎng)條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

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細(xì)胞描述:細(xì)胞體呈細(xì)長(zhǎng)或橢圓,從胞體發(fā)出細(xì)長(zhǎng)而有分支的突起,表面有許多小棘突。常規(guī)染色見(jiàn)核細(xì)長(zhǎng)或三角形,染色較深。電鏡下小膠質(zhì)細(xì)胞染色深,核扁平或鋸齒狀,胞質(zhì)內(nèi)溶酶體較多。小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量少,約占全部膠質(zhì)細(xì)胞的5%。此細(xì)胞是定居在腦內(nèi)的吞噬細(xì)胞,在炎癥刺激下,其抗原性增強(qiáng),形態(tài)伸展,功能活躍。小膠質(zhì)細(xì)胞在腦內(nèi)各部分均有分布,在灰質(zhì)中的數(shù)量比在白質(zhì)中的多5倍。海馬、嗅葉和基底神經(jīng)節(jié)的小膠質(zhì)細(xì)胞比丘腦和下丘腦的多,而腦干與小腦中zui少。

起源于神經(jīng)外胚層。 Ling(1981)的實(shí)驗(yàn)證明,小膠質(zhì)細(xì)胞起源于血循環(huán)中的單核細(xì)胞,后者進(jìn)入發(fā)育中的中樞神經(jīng)系統(tǒng)后轉(zhuǎn)變成具有吞噬能力的阿米巴樣小膠質(zhì)細(xì)胞。阿米巴樣小膠質(zhì)細(xì)胞在吞噬中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)一些自然退變的殘余物,同時(shí)進(jìn)行繁殖。至中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育完成后,它們變成靜止小膠質(zhì)細(xì)胞。當(dāng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷時(shí),靜止小膠質(zhì)細(xì)胞被激活成巨噬細(xì)胞,與血循環(huán)浸入的單核細(xì)胞一齊吞噬碎片和退化變性的髓鞘。當(dāng)損傷*后,它們又恢復(fù)為小膠質(zhì)細(xì)胞。在尼氏法與HE染色切片中其形狀常有變異,這主要與其進(jìn)行運(yùn)動(dòng)及吞噬異物有關(guān)。

在細(xì)胞增長(zhǎng)和產(chǎn)物形成過(guò)程中,每間隔一段時(shí)間,從中取出部分培養(yǎng)物,再用新的培養(yǎng)液補(bǔ)足到原有體積,使反應(yīng)器內(nèi)的總體積不變。 這種類(lèi)型的操作是將細(xì)胞接種一定體積的培養(yǎng)基,讓其生長(zhǎng)至一定的密度,在細(xì)胞生長(zhǎng)至zui大密度之前,用新鮮的培養(yǎng)基稀釋培養(yǎng)物,每次稀釋反應(yīng)器培養(yǎng)體積的1/2~3/4,以維持細(xì)胞的指數(shù)生長(zhǎng)狀態(tài),隨著稀釋率的增加培養(yǎng)體積逐步增加。或者在細(xì)胞增長(zhǎng)和產(chǎn)物形成過(guò)程中,每隔一定時(shí)間,定期取出部分培養(yǎng)物,或是條件培養(yǎng)基,或是連同細(xì)胞、載體一起取出,然后補(bǔ)加細(xì)胞或載體,或是新鮮的培養(yǎng)基繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)的一種操作模式。剩余的培養(yǎng)物可作為種子,繼續(xù)培養(yǎng),從而可維持反復(fù)培養(yǎng),而無(wú)需反應(yīng)器的清洗、消毒等一系列復(fù)雜的操作。在半連續(xù)式操作中由于細(xì)胞適應(yīng)了生物反應(yīng)器的培養(yǎng)環(huán)境和相當(dāng)高的接種量,經(jīng)過(guò)幾次的稀釋、換液培養(yǎng)過(guò)程,細(xì)胞密度常常會(huì)提高

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