L-929細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品名稱：L-929細(xì)胞

中文名稱：小鼠成纖維細(xì)胞；小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆，

生長(zhǎng)狀態(tài)：貼壁生長(zhǎng)

形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞

組織來(lái)源：組織：皮下結(jié)締組織；疏松結(jié)締組織及脂肪 品系：C3H/An

微生物及支原體檢測(cè)：陰性

細(xì)胞背景：1948年三月建立了NCTC clone 929(小鼠結(jié)締組織)，細(xì)胞系L的克隆。細(xì)胞系L是zui早建立的連續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞系之一，而clone 929是zui早的克隆株。 從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松結(jié)締組織入脂肪組織中建立了親本細(xì)胞系L。 第95代的細(xì)胞系L使用毛細(xì)管法分離單細(xì)胞建立了clone929。 檢測(cè)發(fā)現(xiàn)鼠痘病毒陰性。

培養(yǎng)條件：MEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)41500034，添加NaHCO3 1.5g/L，Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。

安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。

L-929細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞；“慧穎"提醒您收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒(méi)有特別說(shuō)明，收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。注：1、觀察細(xì)胞在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。3、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。4、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)及時(shí)與我們。..

L-929細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞，“慧穎"建議您胎牛血清使用GIBCO FBS-10099-141或HYCLONE FBS-SH30084.03，培養(yǎng)這個(gè)細(xì)胞，一定要用好的血清，這兩款貨號(hào)的血清素爾都可以提供，現(xiàn)貨，全程干冰運(yùn)送，*，GIBCO 澳洲源優(yōu)等胎牛血清（貨號(hào)：10099-141）：http://www.chem17.com/st274540/product_19732281.html和HYCLONE 澳洲源優(yōu)等胎牛血清（貨號(hào)：SH30084.03）：http://www.chem17.com/st274540/product_19082965.html。凍存方法：凍存液：90%胎牛血清，10%DMSO，液氮儲(chǔ)存。

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