IMR90細胞- IMR90細胞株；全國各地均可出售，誠招全國代理商

【產(chǎn)品名稱】人胚肺成纖維細胞

【細胞代號】IMR90細胞

【生長狀態(tài)】貼壁生長

【細胞形態(tài)】成纖維細胞

【庫存狀態(tài)】現(xiàn)貨

【運輸形式】復(fù)蘇活細胞或凍存細胞

【復(fù)蘇意義】細胞復(fù)蘇是將休眠的細胞重新活化，使之重新生長進入細胞周期，進而分裂產(chǎn)生子細胞，重新獲得細胞類型特異的生物學功能。

IMR90細胞- IMR90細胞株；收到細胞株包裹時， 請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形， 若有請立即通知。細胞株請盡速開始培養(yǎng)， 或立即冷凍保存(置于–70 °C， 隔夜后， 移到liq N2)。

細胞復(fù)蘇的原則－快速融化：

必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。

具體操作

一. 實驗前準備：

1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃

2.用75％酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。

3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。

二．取出凍存管：

1.根據(jù)細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。

2.從液氮罐中取出細胞盒，取出所需的細胞，同時核對管外的編號。

三．迅速解凍：

1.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍，并要不斷的搖動，使管中的液體迅速融化。

2.約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁，再拿入超凈臺內(nèi)。

四.平衡離心：用架盤天平平衡后，放入離心機中3000r/min 離心3min

五.制備細胞懸液：

1.吸棄上清液。

2.向離心管內(nèi)加入10ml培養(yǎng)液，吹打制成細胞懸液。

六.細胞計數(shù)：細胞濃度以5×105/ml為宜。

七.培養(yǎng)細胞將復(fù)合細胞計數(shù)要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi)，將培養(yǎng)瓶放入37℃和5％CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時（或者24-48小時）后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng)，換液的時間由細胞情況而定。

初學者易犯錯誤：

1水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。

2.水浴鍋內(nèi)凍存管太多，導(dǎo)致傳熱不佳，使融化時間延長。

3.離心前忘記平衡，導(dǎo)致離心機損壞和細胞丟失。

4.一次復(fù)蘇細胞過多，忘記更換吸頭和吸管，導(dǎo)致細胞交叉污染。

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