H3255細胞價格NCI-H3255人肺癌細胞株  慧穎庫存現(xiàn)貨 全國各地均可銷售 采用誠信順豐或聯(lián)邦快遞運送，確保全國各地隔日到達客戶手中

【中文名稱】人肺癌細胞株

【英文名稱】NCI-H3255或H3255

【來源】美國ATCC

【代數(shù)】3-5代

【細胞檢測】細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

【細胞凍存】液氮凍存（基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS

【細胞運輸】干冰運輸（1 Vial）或活細胞運輸（T-25 flasks）

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注意，新復蘇的細胞不要經(jīng)常去看去動。

換液的話，只要把培養(yǎng)基吸出，再加入新的培養(yǎng)基就可以了

如果復蘇的細胞長得很不均勻，可以胰酶消化下來再混勻后在重新加進去（像正常細胞一樣做）

復蘇的原則－快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。

  收到細胞株包裹時， 請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形， 若有請立即通知。細胞株請盡速開始培養(yǎng)， 或立即冷凍保存(置于–70 °C， 隔夜后， 移到liq N2)。

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冷凍細胞解凍程序:

依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它之成份和比例， 制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類， 若因?qū)嶒炐枰?必須有所不同時， 務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成， 確定細胞適應后， 方進行所需之實驗。

FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單之血清種類培養(yǎng)之。

將培養(yǎng)基置于 37 °C水槽中回溫，回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之， 移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管， 立即放入37 °C 水槽中快速解凍， 水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿， 否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化后， 以70 % ethanol 擦拭冷凍管外部， 移入無菌操作臺內(nèi)。

依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)取 10 ml培養(yǎng)基加至 T25或 T75 flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T25 或T75 flask 內(nèi)之培養(yǎng)基， 混 合均勻，放入37 °C，5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

對絕大多數(shù)細胞而言，1 % 以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。唯對極少數(shù)因?qū)MSO 敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO 者， 則可將解凍后之細胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養(yǎng)基中,離心300 xg (約1000 rpm)，5 分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后， 轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中， 再放入37 °C， 5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。收到T25 flask 細胞時， 處理方式為︰

1. 于寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T25 flask 均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask 外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題， 不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。

2. 將原封之T25 flask 靜置于37 °C， 5 % CO2 培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至37 °C， 并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基，(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約5-10ml 培養(yǎng)基于flask 內(nèi)，依 一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中或細胞已長滿盤， 則將細胞做傳代培養(yǎng)。

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